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HPLC-ELSD測定黃芪注射液中黃芪甲苷的含量
2011-11-10 [4015]

摘要

黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根。春秋兩季采挖,除去須根及根頭,曬干。由于來源、產地、處理方式的不同,會導致黃芪的質量*不同,從而直接影響其藥用價值,因此必須建立一套完整的質量控制方法。

內容

HPLC-ELSD檢測方法測定黃芪注射液中黃芪甲苷的含量

 

黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)

Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。春秋兩季采挖,除去須根及根頭,曬干。

由于來源、產地、處理方式的不同,會導致黃芪的質量*不同,從而直接影響其藥用價值,因此必須建立一套完整的質量控制方法。

一、實驗過程

1.1 儀器

ELSD MODEL 200  SofTA Coporation

  液相系統:泵

  工作站:色譜采集系統

1.2 試劑

乙腈:色譜純

  :純凈水

甲醇:色譜純

黃芪甲苷對照品;黃芪注射液;黃芪陰性試劑

1.3 色譜系統及ELSD參數

  色譜柱:C18    250×4.6mm

流動相:乙腈:水(3268

流速:1.00 mL/min

ELSD參數: DF=60℃SC=30℃

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下圖為在上述色譜條件下測定的黃芪對照品與黃芪注射液ELSD色譜圖:

1.4 曲線方程及線性關系

取對照品溶液配制成0.1、0.3、0.5、0.71mg/mL的溶液,以濃度對數值為橫坐標,以峰面積對數值為縱坐標作回歸,方程為:y=1.48528x+2.26890,r2=0.9997,進樣量為20μL(滿環進樣,濃度在0.1-1mg/mL呈良好的線性關系。

1.5 系統適應性實驗

取供試品溶液2.0mL,按上述色譜條件,滿環進樣20μL,黃芪甲苷的保留時間為9.5min左右,理論塔板數不低于10000,托尾因子為1.06左右,分離度不小于5.0。

1.6樣品的含量測定

分別取黃芪注射液三批,按上述色譜條件,滿環進樣20μL。測定結果見表1。

1樣品中黃芪甲苷的含量測定

 

 

批號

含量mg

0509101

2.35

0509103

1.98

0509105

2.17

 

二、討論

ELSD主要用于沒有紫外吸收或為紫外末端弱吸收的樣品,或流動相有紫外吸收干擾或梯度洗脫時基線漂移影響測定;ELSD檢測,流動相在漂移管便氣化蒸發,不影響樣品檢測。

黃芪甲苷是黃芪為原料的中藥制劑的主要質量控制指標。其含量測定方法有薄層色譜、HPLC—紫外放,采用ELSD作為檢測器—HPLC法也已見報道,但都存在樣品前處理復雜、色譜干擾多且干擾成分大等缺點。

由于ELSD本身的響應特性,黃芪甲苷濃度與其峰面積值并不呈線性,而將濃度與峰面積同時取以10為底的對數后可在一定范圍內(0.11mg/ml)得到理想的線性關系(r2=0.9997)。

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